“HH34”通过精心收集，向本站投稿了5篇来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达，下面小编给大家整理后的来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达，希望大家喜欢！
篇1：来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达
来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达
柠檬酸杆菌(Citrobacter braakii)来源的植酸酶是目前报道的比活最高的植酸酶.按照毕赤酵母(Pichia pastoris)对密码子的选择偏向性,对来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因AppA 进行了密码子优化改造.改造后的.基因AppA(m)按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体pPIC9的α-因子信号肽编码序列3′端,通过电击转化得到重组转化子.通过PCR验证,AppA(m)已整合在酵母染色体上.SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,植酸酶得到了高效分泌表达,在5L发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到3.2mg/mL发酵液,发酵效价达到每毫升发酵液1.4×107IU以上,高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价.
作 者：黄火清 罗会颖 柏映国 王亚茹 姚斌 孟昆 袁铁铮 杨培龙 作者单位：中国农业科学院饲料研究所,北京,100081 刊 名：微生物学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA MICROBIOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 46(6) 分类号：Q78 关键词：高比活植酸酶 基因改造 毕赤酵母 高效表达
篇2：黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母GS-115系统中的表达
黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母GS-115系统中的表达
将黑曲霉(Aspergillus niger)NRRL3135中的植酸酶基因转入毕赤酵母GS-115中,并整合到染色体DNA上,然后进行诱导表达.通过SDS-PAGE对表达产物进行鉴定,发现重组毕赤酵母GS-115分泌了1个约100 kD的蛋白,分泌的蛋白较大.用脱糖基化酶endoglycosidase H降解后,形成了约50 kD的`蛋白,与植酸酶基因产物的理论值相符.通过对表达产物的酶学性质研究,发现该表达产物在pH 2.5和pH5.5时具有较高植酸酶活性,同时该表达产物的最适温度约为55℃.这说明植酸酶得到正确的分泌表达.
作 者：康伟 王智 詹冬玲 雷霆 冯雁 KANG Wei WANG Zhi ZHAN Dong-ling LEI Ting FENG Yan 作者单位：吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,长春,130023 刊 名：吉林农业大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF JILIN AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)：2006 28(6) 分类号：Q786 关键词：植酸酶 毕赤酵母GS-115 黑曲霉篇3：α-淀粉酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究
α-淀粉酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究
以克隆自野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因质粒(pHN8004)为模板,通过PCR方法将α-淀粉酶基因克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905A中,转化毕赤酵母GS115.利用甲醇对重组毕赤酵母GS115(pHBM905AM1)进行诱导,实现了表达.培养温度为28℃,用体积分数为1.0%的甲醇诱导,第7天分泌表达的.α-淀粉酶酶活性最高,为1 081 U・mL-1,该酶的最适反应温度和最适反应pH值分别为50℃和5.9.
作 者： 作者单位： 刊 名：河南农业大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 40(3) 分类号：Q939 关键词：α-淀粉酶基因 毕赤酵母 表达 酶学性质 最适温度 最适pH值篇4：植酸酶基因的多点突变及在毕赤酵母中的高效表达
植酸酶基因的多点突变及在毕赤酵母中的高效表达
根据毕赤酵母基因的密码子选择偏爱性,不改变其编码氨基酸序列,对来源于黑曲霉N25植酸酶phyA基因进行了突变,构建了含有正确突变的酵母表达载体pPIC9k-phyAm-4,电击转化毕赤酵母,获得优化了密码子的重组酵母转化子.经PCR鉴定表明,植酸酶基因已整合到酵母基因组中;表达产物的`SDS-PAGE分析表明,酶蛋白分子大小为70.15kDa.Southern blotting结果表明,phyA基因整合到酵母染色体DNA中;转化子酶活测定结果表明,经密码子优化的重组酵母PP-NPm-4-2酶活可达136 900U/ml,比Arg没有优化的PP-NPm-8(47600U/ml)酶活高约2.8倍.
作 者：许钦坤 王红宁 李洪淼 XU Qin-kun WANG Hong-ning LI Hong-miao 作者单位：许钦坤,XU Qin-kun(四川农业大学动物科技学院,雅安,625014;韶关学院英东生物工程学院,韶关,51)王红宁,李洪淼,WANG Hong-ning,LI Hong-miao(四川农业大学动物科技学院,雅安,625014)
刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)：2006 26(5) 分类号：Q94 关键词：植酸酶 多点突变 毕赤酵母 高效表达篇5：草鱼生长激素基因在毕赤酵母中的表达
草鱼生长激素基因在毕赤酵母中的表达
将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中, 经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子.菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上.对重组酵母进行诱导表达, SDS-PAGE和Western印迹分析,结果表明cGH在毕赤巴斯德酵母GS115菌株中获得了高效表达.
作 者：孟亚鹏 徐敏 代焕梅 丁秀琼 张海英 殷雪 刘世贵 龙章富 MENG Ya-peng XU Min DAI Huan-mei DING Xiu-qiong ZHANG Hai-ying YIN Xue LIU Shi-gui LONG Zhang-fu 作者单位：孟亚鹏,徐敏,代焕梅,丁秀琼,张海英,殷雪,MENG Ya-peng,XU Min,DAI Huan-mei,DING Xiu-qiong,ZHANG Hai-ying,YIN Xue(四川大学生命科学学院,成都,610064)刘世贵,龙章富,LIU Shi-gui,LONG Zhang-fu(四川大学生命科学学院,成都,610064;成都川大创新生物技术研究所)
刊 名：四川动物 ISTIC PKU英文刊名：SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY 年，卷(期)：2006 25(1) 分类号：Q959.4 TQ926 关键词：草鱼 生长激素基因 pPIC9K表达载体 毕赤酵母 高效表达
