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篇1：水稻OsRhoGDI2蛋白生物信息学分析及亚细胞定位研究
水稻OsRhoGDI2蛋白生物信息学分析及亚细胞定位研究
水稻OsRhoGDI2是通过酵母双杂交筛选到的小G蛋白Rho家族成员OsRacD的互作蛋白的编码基因,为研究OsRhoGDI2和OsRacD的相互作用特点和调控机制,对OsRhoGDI2进行了生物信息学分析和亚细胞定位检测.通过生物信息学方法比较了二者编码蛋白的'理化性质、修饰位点和亚细胞定位特点,并进一步构建了受控于CaMV35S启动子的与绿色荧光蛋白融合表达的OsRhoGDI2基因的双元植物表达载体,采用农杆菌介导法转化洋葱表皮细胞,通过荧光显微镜观察了融合蛋白在活细胞内分布特点.OsRhoGDI2和OsRacD具有一些相似的理化特性和翻译后修饰位点,在洋葱表皮细胞中,OsRhoGDI2主要分布在细胞质、细胞膜和细胞核.OsRhoGDI2与OsRacD在蛋白理化特性和胞内分布上存在一定的相关性,OsRhoGDI2蛋白可能在调控OsRacD的胞内分布和活性中发挥重要作用.
作 者：彭威风 梁卫红 作者单位：河南师范大学生命科学学院,新乡,453007 刊 名：生物技术通报 PKU英文刊名：BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： “”(5) 分类号： 关键词：OsRhoGDI2 蛋白互作 植物表达载体 亚细胞定位篇2：Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及荧光共定位研究
Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及荧光共定位研究
目的:观察脑信号蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及两者的荧光共定位情况,为明确Sema4C和GIPC在亚细胞水平的相互作用提供佐证.方法:将Sema4C的'基因编码区全长、胞外段和胞内段分别构建到pEGFPN1和pEGFPC1表达载体中,将GIPC编码区基因构建到pDsRed-C1表达载体中,分别转染HEK293细胞,观察亚细胞定位;将pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分别共转染HEK293和COS7细胞,观察两者的荧光共定位情况.结果:酶切鉴定及测序结果表明重组载体构建正确,Sema4C蛋白全长和胞外段呈跨膜分布,而胞内段在全细胞中呈弥散样分布;GIPC在胞浆内呈斑块状聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在荧光共定位区域.结论:Sema4C主要在胞膜和胞浆内表达.GIPC主要在胞浆内呈斑块样聚集分布;Sema4C和GIPC之间存在荧光共定位.
作 者：吴燕 吴海涛 刘淑红 范文红 范明 WU Yan WU Hai-Tao LIU Shu-Hong FAN Wen-Hong FAN Ming 作者单位：军事医学科学院,基础医学研究所,北京,100850 刊 名：生物技术通讯 ISTIC英文刊名：LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 19(3) 分类号：Q25 关键词：Sema4C 脑信号蛋白 GIPC HEK293细胞 COS7细胞 激光共聚焦显微镜
篇3：用于蛋白亚细胞定位研究的烟草愈伤组织培养条件优化
用于蛋白亚细胞定位研究的烟草愈伤组织培养条件优化
使用绿色荧光蛋白作为报告基因来研究目的蛋白的亚细胞定位得到广泛应用.使用稳定表达系统研究蛋白的亚细胞定位比较耗时,但可以先选择愈伤组织进行观察以确保构建的载体能够表达.优化了愈伤组织的培养条件,得到了质地疏松柔软的`白色愈伤,不受叶绿体的荧光干扰,便于进行荧光观察.
作 者：夏玉凤 XIA Yu-feng 作者单位：河北师范大学,生命科学学院,河北,石家庄,050016 刊 名：河北师范大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF HEBEI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 30(3) 分类号：Q786 关键词：稳定表达 亚细胞定位 融合蛋白 愈伤组织篇4：人铁调节蛋白1依靠其亚细胞定位进行折叠和转换
人铁调节蛋白1依靠其亚细胞定位进行折叠和转换
顺鸟头酸酶是不同生物体中催化柠檬酸盐和异柠檬酸盐的相互转变的铁-硫水解酶.真核生物中的顺乌头水解酶具有额外角色,如多细胞生物双重活性细胞溶质顺鸟头酸酶-铁调节蛋白1.在酵母线粒体中这种蛋白质的产生用于检测某些特定细胞器中铁调节蛋白1的折叠,这些细胞器是硫铁蛋白合成的部位.人铁调节蛋白1的这种行为类似于酵母和人类的真正的线粒体顺乌头酸酶.所有在酵母线粒体中的酶都是有活性的,但在电子显微镜观察下铁调节蛋白1形成高密度颗粒.纯化的'包涵体进行MS分析证实了人铁调节蛋白l和酮戊二酸脱氢酶合成元件1,一个酮戊二酸脱氢酶亚单位的存在.酮戊二酸脱氢酶合成元件1触发线粒体聚集物的形成,因为后者在酮戊二酸脱氢酶合成元件1-突变体中缺乏,使得聚集物形成不像在细胞溶质中那么有效.对经过纯化的线粒体进行元素分析可知,虽在线粒体中铁调节蛋白1的铁结合量和硫铁簇合成迅速,但这种高密度颗粒含铁并不充足.数据表明,具有双重活性的细胞溶质铁调节蛋白1顺乌头酸酶的适当折叠在线粒体中比在真正线粒体顺乌头酸酶少.此外,有效清除聚集铁调节蛋白1-酮戊二酸脱氢酶合成元件1复合物,并不发生在细胞器中,这就强调分子的相互作用决定了铁调节蛋白1的命运.此外,人铁调节蛋白1的正确折叠相对于其他顺鸟头酸酶家族的成员来说很大程度上决定于它所在的细胞环境.
作 者：郑芳 温玉荣 郑全庆 作者单位：西安交通大学医学院,陕西,西安,710061 刊 名：国外医学(医学地理分册) 英文刊名：FOREIGN MEDICAL SCIENCES(SECTION OF MEDGEOGRAPHY) 年，卷(期)： 30(1) 分类号：Q581 Q5 关键词：聚集物 铁-硫簇生源说 酮戊二酸脱氢酶 啤酒酵母 易位篇5：荧光蛋白标记的GABAB受体在CHO中的表达及亚细胞定位
荧光蛋白标记的GABAB受体在CHO中的表达及亚细胞定位
目的 确定荧光蛋白标记是否影响GB1、GB1asa和GB2亚基在CHO细胞中的表达、亚细胞定位及功能.方法 构建GB1-DsRed2和GB1asa-DsRed2真核表达载体,利用ELISA和IP3积累法检测融合蛋白在CHO细胞中的表达情况及功能,在激光扫描共聚焦显微镜下观测融合蛋白的亚细胞定位.结果 荧光蛋白标记既不影响GB1、GB1asa和GB2亚基的表达,也不影响GB1和GB2在CHO细胞上的共定位过程,同时对二聚体的功能不存在显著的影响.结论 GB1-DsRed2、GB1asa-DsRed2和GB2-EGFP在CHO细胞中具有正常的生理功能和分布,为进一步研究GABAB受体在细胞膜上的`运动及分布以及各亚基之间的相互作用奠定了基础.
作 者：曹建华 张扬 黄思罗 李莹 易平刘剑峰 CAO Jianhua ZHANG Yang HUANG Siluo LI Ying YI Ping LIU Jianfeng 作者单位：华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室,武汉市,430074 刊 名：医学分子生物学杂志 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 5(3) 分类号：Q42 关键词：G蛋白偶联受体 GABAB受体 亚细胞定位篇6：水稻OsWRKY10与GFP融合基因的烟草转化及亚细胞定位观察
水稻OsWRKY10与GFP融合基因的烟草转化及亚细胞定位观察
OsWRKY10是一个新的.WRKY类转录因子.该项研究构建了OsWRKY10基因与绿色荧光蛋白基因融合的增强表达载体pCamU-OsWRKY10-GFP.将载体转入根瘤农杆菌EHA105中,叶盘转化法转化烟草.转化植株经PCR鉴定呈阳性.通过荧光显微镜可检测到绿色荧光蛋白在根细胞的核中表达,并且OsWRKY10基因定位在细胞核.
作 者：赵佩欧 谢科 郭泽建 ZHAO Pei-ou XIE Ke GUO Ze-jian 作者单位：赵佩欧,ZHAO Pei-ou(浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029)谢科,XIE Ke(浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029;中国农业大学,植物病理系,北京,100094)
郭泽建,GUO Ze-jian(中国农业大学,植物病理系,北京,100094)
刊 名：浙江农业学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS 年，卷(期)：2006 18(3) 分类号：Q341 关键词：农杆菌介导 转基因烟草 WRKY基因 绿色荧光蛋白
